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禽类间充质干细胞的研究探索与前景(2)

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摘要：

1.2 入选标准

纳入标准：有关禽类间充质干细胞来源、分离、纯化、培养和诱导分化的文献。文献内容相关程度高，具有原创性，且观点明确，论据可靠。

排除标准:内容陈旧、重复性文章。

1.3 文献质量评估共检索到113篇文献，阅读标题与摘要进行筛选，排除与此文无关的文献，最后共纳入42篇文献。文献类型包括实验研究和综述文献。

2 结果 Results

2.1 禽类间充质干细胞的来源间充质干细胞来源广泛，骨髓、脂肪、皮肤、羊膜、卵黄囊等组织中均能分离到间充质干细胞。

2.1.1 骨髓来源的间充质干细胞骨髓由3种细胞系统组成：造血系统、内皮系统和基质系统。这3种细胞系统皆存在造血干细胞、内皮祖细胞和间充质干细胞。其中骨髓间充质干细胞具有向多种中胚层和神经外胚层组织细胞分化的能力[9]。

Cohnheim等在1867年通过实验推测骨髓内存在非造血功能的干细胞。Caphan[10]把这些具有一定黏附能力，在体外能高度扩增、并可多向分化的干细胞群命名为间充质干细胞。2009年Mahesh从1-14 d龄的鸡骨髓中分离到间充质干细胞，这些间充质干细胞能在体外很好的培养、增殖和分化[11]。Bai等[12]和李双星等[13]相继于2013年和2014年获得北京油鸡和罗曼鹤鸡的骨髓间充质干细胞。Li等[14]从1 d龄鸭骨髓中获得了鸭的骨髓间充质干细胞，并进行了长期的体外培养。大量研究表明骨髓间充质干细胞具备易于分离培养、增殖纯化、多次传代扩增后仍具有干细胞特性、免疫原性低、体外基因转染率高并能在宿主体内长期存活等优点。

2.1.2 脂肪组织来源的间充质干细胞脂肪间充质干细胞不仅来源丰富、取材方便，而且同骨髓间充质干细胞有着相似的生物学特性及类似的免疫表型，引起了国内外研究者的广泛关注。2001年Zuk等[15]分离获得了人的脂肪源间充质干细胞。禽类的脂肪间充质干细胞研究相对少，2011年Gong等[16]从1 d龄鸡皮下脂肪组织中首次分离到鸡的脂肪间充质干细胞，唐小洪等[17]于2014年建立鸡的脂肪源间充质干细胞的分离与鉴定方法。这些间充质干细胞表达CD29、CD44及CD71等表型，不表达造血干细胞表面标志CD45、CD34，并具有向脂肪细胞、成骨细胞分化的能力。

2.1.3 皮肤来源的间充质干细胞随着从骨髓、胎盘、脐带和骨骼肌等组织中分离间充质干细胞的研究日益广泛，人们开始从皮肤组织中分离间充质干细胞。杨立业等[18]从小鼠的皮肤组织中分离到原代的皮肤间充质干细胞，这些细胞多次传代后仍具有形态均一、体外增殖迅速等特征和向成骨细胞、脂肪细胞和神经元样细胞分化的潜能。Gao等[19]从16 d龄鸡的背侧皮肤组织中分离到能表达CD29、CD44及CD71等表面标志和具有成骨、成脂和成神经组织分化能力的鸡皮肤间充质干细胞。

2.1.4 脐带Wharton's Jelly来源的间充质干细胞1991年Mcelreavey等[20]首次从人脐带的Wharton’s Jelly中分离培养到了一种成纤维样细胞，具有较高的分化潜能，可向多个方向进行分化的间充质干细胞。脐带Wharton's Jelly间充质干细胞不仅自身免疫原性弱，而且可以抑制同种异体免疫反应，降低移植物抗宿主反应。2013年Bai等[21]从鸡的Wharton's Jelly中分离得到鸡的脐带Wharton's Jelly间充质干细胞。脐带Wharton's Jelly间充质干细胞和骨髓间充质干细胞具有很多相似的生物学特性，如在细胞形态学方面均为成纤维细胞样细胞，呈漩涡状生长，具有一定的方向性，都能诱导分化为成骨细胞、成脂细胞和神经细胞。

2.1.5 羊膜来源的间充质干细胞以往研究从人羊膜培养出间充质干细胞，经免疫表型鉴定与骨髓间充质干细胞相似，并且其比骨髓来源的间充质干细胞具有更强的扩增能力；同时从羊膜中提取间质干细胞来源广泛，受社会伦理学限制较少等优点，成为干细胞来源的主要研究目标。2014年Li等首次分离培养了羊膜间充质干细胞，该羊膜间充质干细胞表达CD29、CD44及CD71等表面标志和干细胞标志基因Oct4，并能诱导分化为成骨细胞、成脂细胞和成肌细胞。

2.1.6 其他来源的间充质干细胞很多学者报道，从禽类骨组织、卵黄囊、胚胎肺脏和胚胎肝脏等组织器官中均成功分离出禽类间充质干细胞[22-26]。

2.2 禽类间充质干细胞的分离、纯化和培养由于间充质干细胞在组织中的含量低，获取高纯度的间充质干细胞就显得尤为重要。目前最常用的分离间充质干细胞的方法有组织消化法、全骨髓贴壁法和密度梯度离心法。不同组织来源的间充质干细胞分离方法不同，但是禽类间充质干细胞大多数采用组织消化法+差速贴壁法进行分离培养。对于人和鼠骨髓、外周血和脐血等主要采用Percoll或Ficoll离心方法分离单个核细胞，然后用贴壁法进一步分离纯化间充质干细胞。改进密度梯度离心法，可提高了骨髓源间充质干细胞的分离效率和富集[27]。

文章来源：《中国家禽》网址: http://www.zgjqzz.cn/qikandaodu/2021/0319/416.html